Данная информация предназначена для профессионалов в области здравоохранения и фармацевтики. Пациенты не обязаны использовать эту информацию в качестве медицинских советов или рекомендаций.
Возможности ПЦР (полимеразной цепной реакции)
Полимеразная цепная реакция,
знаменитая более как "ПЦР" не сходит с заголовков статей научных журналов с тех
пор, как была открыта Кэри Б. Мюллисом в 1983 году, за что он и был удостоен
Нобелевской премии. Часто её обрисовывают как метод, с подмогою которого ученые
могут сыскать иглу в стоге сена и затем строить стог из этих игл."Иглой"
является крошечный фрагмент генетического материала, а ПЦР не только точно
обнаруживает этот фрагмент, но и затем, используя природное свойство ДНК-
репликацию (размножение), делает его копии.
В течение нескольких часов с
подмогою ПЦР из одного фрагмента молекулы ДНК можно получить более 100 млрд.
идентичных молекул.Таким образом, можно выучить генетический материал,
присутствующий в крошечных количествах. Принцип этой реакции достаточно прост и
теоретически для её исполнения нужны лишь пробирка, несколько реагентов и
источник тепла. Препарат ДНК, который необходимо копировать, может быть чистым,
а может представлять собой очень трудную смесь биологических веществ. В качестве
источника ДНК подходит и биоптат ткани пациента, и одиночный человеческий волос,
и капля засохшей крови, обнаруженная на месте правонарушения, и мозг мумии и даже
тело мамонта, пролежавшего 40 000 лет в постоянной мерзлоте.
Анализ генетического материала
неподражаемо актуален для медицинской диагностики и ПЦР раскрывает для этого новые
перспективы. ПЦР – метод молекулярной диагностики, ставший для ряда заболеваний
"золотым стандартом", проверен временем и тщательно апробирован клинически.
Что же может ПЦР?
Главные медицинские области применения этого метода – диагностика
инфекций и потомственных заболеваний.ПЦР раскрывает поистине фантастические
возможности анализа генома человека – выявления дефектных генов, определяющих
потомственную предрасположенность к заболеваниям.Вместе с тем, занимательно и
обнаружение генов, несущих информацию о полезных признаках.Например, генов
снижающих риск опухолевого перерождения тканей или генов, веско
убавляющих вероятность заражение ВИЧ-инфекцией.ПЦР используется также при
генетической идентификации личности, определении ступени родства.Только
результат анализа ДНК дозволяет конечно дать заключение о достоверности
отцовства.
Но, пожалуй, самое широкое
распространение метод ПЦР в истиннее время получил как метод диагностики
разных инфекционных заболеваний. ПЦР дозволяет выявлять этиологию инфекции
даже если в пробе, взятой на анализ содержится всего несколько молекул ДНК
возбудителя. ПЦР широко используется в для ранней диагностики ВИЧ-инфекции,
вирусных гепатитов, клещевого энцефалита, туберкулеза, заболеваний, передающихся
половым маршрутом и т.д. На теперешний день практически нет инфекционного агента,
которого нельзя было бы выявить с подмогою ПЦР.
Всем знаменита длительность
процедуры классических методов бактериологического выделения возбудителя
туберкулеза: иногда подтверждение диагноза может занимать 5 –6 месяцев.Если
использовать метод ПЦР, этот срок можно сократить до нескольких
часов.Высокочувствительный анализ проведенный сразу после укуса клеща позволит
ответить на вопрос произошло ли заражение вирусом клещевого энцефалита или
боррелиозом – методы профилактики и лечения этих клещевых инфекций абсолютно
разны. Это лишь самые ясные образцы превосходств данного анализа.
Главное значение метод имеет для
мониторинга и оценки эффективности терапии, неподражаемо при вирусных
заболеваниях.Определение “вирусной нагрузки”, т.е. количества вирусных частиц в
крови дозволяет осуществить индивидуальный подбор дозы противовирусных
препаратов. При подмоги ПЦР удается выявить отдельные субтипы и штаммы вирусов и
бактерий, владеющих повышенной устойчивостью к тем или иным целебным
препаратам.
Разговаривая о несомненном
прогрессивном значении метода ПЦР, его неоспоримых превосходствах, вместе с тем,
следует знать и об определенных проблемах его проведения. Чрезвычайная
чувствительность метода требует взыскательно соблюдения специального технологического
режима, тщательного исполненья всех этапов анализа в отдельных изолированных
зонах лаборатории. Недостаточная внимательность к процедурным тонкостям влечет
неминуемую контаминацию проб и появление неправильно- положительных результатов.
Широкое использование
недостаточно отработанных тестов при диагностики урогенитальных заболеваний, к
раскаянью, часто приводит к неверному результату и неосновательному назначению
дорогостоящей терапии, иногда оставляющей массу побочных эффектов. Таким
образом, бесчестное проведение анализа водит к незаслуженной дискредитации
метода.
С иной стороны, метод ПЦР,
как и любой иной тест антигенной диагностики во многом зависит от правильности
забора и транспортировки исследуемого материала. Взятая “не с того места” проба
может вообще не содержать возбудителя. Неподражаемо взыскательны к условиям
хранения и транспортировки РНК -содержащие вирусы: вирус ВИЧ, гепатита С,
клещевого энцефалита.Если до проведения анализа пройдет более 6 часов, такие
пробы обязаны быть непременно подвергнуты глубокой заморозке.
Для правильной интерпретации
результатов необходимо также знать, что выявление ДНК возбудителя не всегда
разговаривает о состоянии его жизнеспособности, а также о непосредственной связи
выявленного инфекционного агента с конкретным патологическим процессом.Результат
ПЦР веско увеличивает свою информативность при комплексном обследовании
пациентов с дополнительным использованием иных лабораторных (иммуноферментных,
биохимических и др.) и клинических исследований.
Статья опубликована на сайте
http://www.rusmg.ru